# HG changeset patch # User dcouvin # Date 1629227715 0 # Node ID f0e3646a4e459f6259e9c59277aedc5f6fa1541f Uploaded diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader.xml --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader.xml Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,56 @@ + + MIRUReader.... + + + python3-openid + emboss + pandas + + +cp $input input.fasta; python3 $__tool_directory__/MIRUReader/MIRUReader.py -r input.fasta -p name 1> $output 2>$logfile + + + + + + + + + + + + + + + +-Git:https://github.com/phglab/MIRUReader.git + + + + 10.1093/bioinformatics/btz771 + + diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/LICENSE --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/LICENSE Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,21 @@ +MIT License + +Copyright (c) 2019 NUS pathogen genomics + +Permission is hereby granted, free of charge, to any person obtaining a copy +of this software and associated documentation files (the "Software"), to deal +in the Software without restriction, including without limitation the rights +to use, copy, modify, merge, publish, distribute, sublicense, and/or sell +copies of the Software, and to permit persons to whom the Software is +furnished to do so, subject to the following conditions: + +The above copyright notice and this permission notice shall be included in all +copies or substantial portions of the Software. + +THE SOFTWARE IS PROVIDED "AS IS", WITHOUT WARRANTY OF ANY KIND, EXPRESS OR +IMPLIED, INCLUDING BUT NOT LIMITED TO THE WARRANTIES OF MERCHANTABILITY, +FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE AND NONINFRINGEMENT. IN NO EVENT SHALL THE +AUTHORS OR COPYRIGHT HOLDERS BE LIABLE FOR ANY CLAIM, DAMAGES OR OTHER +LIABILITY, WHETHER IN AN ACTION OF CONTRACT, TORT OR OTHERWISE, ARISING FROM, +OUT OF OR IN CONNECTION WITH THE SOFTWARE OR THE USE OR OTHER DEALINGS IN THE +SOFTWARE. diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/MIRUReader.py --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/MIRUReader.py Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,213 @@ +#!/usr/bin/python3 + +#Copyright 2019 NUS pathogen genomics +#Written by Cheng Yee Tang (chengyee.tang@nus.edu.sg) +#former python tag !/usr/bin/env python + +import os +import sys +import gzip +import argparse +import pandas as pd +import statistics +import subprocess +from statistics import mode +from collections import Counter + + +#function to determine repeat number based on total number of mismatches in primer sequence +def chooseMode(name, table, CounterList): + maxcount = max(CounterList.values()) + repeatToCheck = [] + for k, v in CounterList.items(): + if v == maxcount: + repeatToCheck.append(k) + x = 0 + for i, j in table.items(): + if name in i: + x += 1 + mismatchDict = {} + for rp in repeatToCheck: + mismatchDict[rp] = 0 + for i in range(x): + string = name + '_' + str(i+1) + if table[string][1] in repeatToCheck: + mismatchDict[table[string][1]] += table[string][0] + checklist2 = [] + for m, n in mismatchDict.items(): + checklist2.append(n) + duplicates = '' + for item in checklist2: + if checklist2.count(item) > 1: + duplicates = 'yes' + finalMode = '' + if duplicates == 'yes': + finalMode = '/'.join(str(r) for min_value in (min(mismatchDict.values()),) for r in mismatchDict if mismatchDict[r]==min_value) + else: + finalMode = min(mismatchDict.keys(), key=(lambda k: mismatchDict[k])) + return finalMode + +''' +Main function +''' + +script_dir = os.path.dirname(os.path.abspath(sys.argv[0])) +MIRU_table = script_dir + "/MIRU_table" +MIRU_table_0580 = script_dir + "/MIRU_table_0580" +MIRU_primers = script_dir + "/MIRU_primers" + +parser = argparse.ArgumentParser() +main_group = parser.add_argument_group('Main options') +main_group.add_argument('-r', '--reads', required=True, help='input reads file in fastq/fasta format (required)') +main_group.add_argument('-p', '--prefix', required=True, help='sample ID (required)') +main_group.add_argument('--table', type=str, default=MIRU_table, help='allele calling table') +main_group.add_argument('--primers', type=str, default=MIRU_primers, help='primers sequences') +optional_group = parser.add_argument_group('Optional options') +optional_group.add_argument('--amplicons', help='provide output from primersearch and summarize MIRU profile directly', action='store_true') +optional_group.add_argument('--details', help='for inspection', action='store_true') +optional_group.add_argument('--nofasta', help='delete the fasta reads file generated if your reads are in fastq format', action='store_true') +args = parser.parse_args() + +if not os.path.exists(args.reads): + sys.exit('Error: ' + args.reads + ' is not found!') + +sample_prefix = args.prefix +sample_dir = os.path.dirname(os.path.abspath(args.reads)) +mismatch_allowed = 18 +psearchOut = sample_dir + '/' + sample_prefix + '.' + str(mismatch_allowed) + '.primersearch.out' + +df = pd.read_csv(MIRU_table, sep='\t') +df_0580 = pd.read_csv(MIRU_table_0580, sep='\t') +miru = [] +with open(args.primers) as primerFile: + for line in primerFile: + miru.append(line.split()[0]) + +#auto detect .fastq, .fastq.gz, .fasta, .fasta.gz +#convert fastq to fasta + +fastaReads = sample_dir + '/' + sample_prefix + '.fasta' +if not args.amplicons: + if '.fastq' in args.reads: + if '.gz' in args.reads: + tmpH = open(fastaReads, 'w') + p1 = subprocess.Popen(['zcat', args.reads], stdout=subprocess.PIPE) + subprocess_args1 = ['sed', '-n', '1~4s/^@/>/p;2~4p'] + subprocess.call(subprocess_args1, stdin=p1.stdout, stdout=tmpH) + tmpH.close() + else: + tmpH = open(fastaReads, 'w') + subprocess_args1 = ['sed', '-n', '1~4s/^@/>/p;2~4p', args.reads] + subprocess.call(subprocess_args1, stdout=tmpH) + tmpH.close() + elif '.fasta' in args.reads: + if '.gz' in args.reads: + with open(fastaReads, 'w') as f: + for line in gzip.open(args.reads, 'rb').readlines(): + f.write(line) + else: + fastaReads = args.reads + +if not args.amplicons: + try: + subprocess_args = ['primersearch', '-seqall', fastaReads, '-infile', args.primers, '-mismatchpercent', str(mismatch_allowed), '-outfile', psearchOut] + subprocess.call(subprocess_args) + except OSError: + print('OSError: primersearch command is not found.') + sys.exit() + +if not os.path.exists(psearchOut): + sys.exit('Error: ' + psearchOut + ' is not found!') + +lookup = {} +repeats = {} +with open(psearchOut, 'r') as infile: + for line in infile.read().splitlines(): + if line.startswith('Primer'): + col = line.split(' ') + loci = str(col[2]) + repeats.setdefault(loci, []) + elif (line.startswith('Amplimer') and len(line) < 12): + col = line.split(' ') + primerID = loci + '_' + str(col[1]) + lookup.setdefault(primerID, []) + mm = 0 + elif 'mismatches' in line: + mm += int(line.partition('with ')[2].rstrip(' mismatches')) + elif 'Amplimer length' in line: + field = line.split(':') + amplicon = int(field[1].strip(' ').rstrip(' bp')) + lookup.setdefault(primerID).append(mm) + if amplicon > 1828: + lookup.setdefault(primerID).append('NA') + elif loci == '0580': + if amplicon > df_0580[loci][25]: + lookup.setdefault(primerID).append('NA') + else: + for i in range(26): + if amplicon < df_0580[loci][i]: + if i != 0: + first = df_0580[loci][i-1] + second = df_0580[loci][i] + if abs(amplicon - first) > abs(amplicon - second): + repeats.setdefault(loci).append(df_0580['No.'][i]) + lookup.setdefault(primerID).append(df_0580['No.'][i]) + break + else: + repeats.setdefault(loci).append(df_0580['No.'][i-1]) + lookup.setdefault(primerID).append(df_0580['No.'][i-1]) + break + else: + repeats.setdefault(loci).append(0) + lookup.setdefault(primerID).append(0) + + else: + if amplicon > df[loci][15]: + lookup.setdefault(primerID).append('NA') + else: + for i in range(16): + if amplicon < df[loci][i]: + if i != 0: + first = df[loci][i-1] + second = df[loci][i] + if abs(amplicon - first) > abs(amplicon - second): + repeats.setdefault(loci).append(i) + lookup.setdefault(primerID).append(i) + break + else: + repeats.setdefault(loci).append(i-1) + lookup.setdefault(primerID).append(i-1) + break + else: + repeats.setdefault(loci).append(0) + lookup.setdefault(primerID).append(0) + +if args.details: + myLookUp = pd.DataFrame(columns=["loci", "hit_index", "repeat_no", "error_no"]) + for key, value in lookup.items(): + #example: lookup = {'0154_1':[2,4]} total no. of mismatches, repeat number + myLookUp = myLookUp.append({"loci":key.split("_")[0], "hit_index":int(key.split("_")[1]), "repeat_no":lookup[key][1], "error_no":lookup[key][0]}, ignore_index=True) + sortedLookUp = myLookUp.sort_values(by=["loci", "hit_index"]) + print(sortedLookUp.to_csv(sep='\t', index=False)) + for item in miru: + #array that used to determine repeat number + print(Counter(repeats[item])) + +miru_repeats = pd.DataFrame(columns = ['sample_prefix'] + miru, index = range(1)) +miru_repeats['sample_prefix'] = sample_prefix +for item in miru: + if repeats[item] != []: + try: + repeat = mode(repeats[item]) + miru_repeats[item][0] = repeat + except statistics.StatisticsError: + repeat = chooseMode(item, lookup, Counter(repeats[item])) + miru_repeats[item][0] = repeat + else: + miru_repeats[item][0] = "ND" + +if args.nofasta: + if ('.fastq' in args.reads) or ('.gz' in args.reads): + os.remove(fastaReads) + +print(miru_repeats.to_csv(sep='\t', index=False, header=True)) diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/MIRU_primers --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/MIRU_primers Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,24 @@ +0154 TGGACTTGCAGCAATGGACCAAC TACTCGGACGCCGGCTCAAAAT +0424 CTTGGCCGGCATCAAGCGCATTATT GGCAGCAGAGCCCGGGATTCTTC +0577 CGAGAGTGGCAGTGGCGGTTATCT AATGACTTGAACGCGCAAATTGTGA +0580 GCGCGAGAGCCCGAACTGC GCGCAGCAGAAACGCCAGC +0802 GGGTTGCTGGATGACAACGTGT GGGTGATCTCGGCGAAATCAGATA +0960 GTTCTTGACCAACTGCAGTCGTCC GCCACCTTGGTGATCAGCTACCT +1644 TCGGTGATCGGGTCCAGTCCAAGTA CCCGTCGTGCAGCCCTGGTAC +1955 AGATCCCAGTTGTCGTCGTC CAACATCGCCTGGTTCTGTA +2059 TCGGAGAGATGCCCTTCGAGTTAG GGAGACCGCGACCAGGTACTTGTA +2163b CGTAAGGGGGATGCGGGAAATAGG CGAAGTGAATGGTGGCAT +2165 AAATCGGTCCCATCACCTTCTTAT CGAAGCCTGGGGTGCCCGCGATTT +2347 GCCAGCCGCCGTGCATAAACCT AGCCACCCGGTGTGCCTTGTATGAC +2401 CTTGAAGCCCCGGTCTCATCTGT ACTTGAACCCCCACGCCCATTAGTA +2461 ATGGCCACCCGATACCGCTTCAGT CGACGGGCCATCTTGGATCAGCTAC +2531 CTGTCGATGGCCGCAACAAAACG AGCTCAACGGGTTCGCCCTTTTGTC +2687 CGACCAAGATGTGCAGGAATACAT GGGCGAGTTGAGCTCACAGAA +2996 TAGGTCTACCGTCGAAATCTGTGAC CATAGGCGACCAGGCGAATAG +3007 TCGAAAGCCTCTGCGTGCCAGTAA GCGATGTGAGCGTGCCACTCAA +3171 GGTGCGCACCTGCTCCAGATAA GGCTCTCATTGCTGGAGGGTTGTAC +3192 ACTGATTGGCTTCATACGGCTTTA GTGCCGACGTGGTCTTGAT +3690 CGGTGGAGGCGATGAACGTCTTC TAGAGCGGCACGGGGGAAAGCTTAG +4052 AACGCTCAGCTGTCGGAT CGGCCGTGCCGGCCAGGTCCTTCCCGAT +4156 TGACCACGGATTGCTCTAGT GCCGGCGTCCATGTT +4348 CGCATCGACAAACTGGAGCCAAAC CGGAAACGTCTACGCCCCACACAT diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/MIRU_table --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/MIRU_table Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,17 @@ +No. 0154 0424 0577 0580 0802 0960 1644 1955 2059 2163b 2165 2347 2401 2461 2531 2687 2996 3007 3171 3192 3690 4052 4156 4348 +0 402 537 171 175 354 482 565 116 437 67 195 335 252 347 150 395 285 498 326 492 272 163 563 540 +1 455 588 208 252 408 537 618 149 514 136 270 392 305 404 200 447 336 551 380 545 330 274 622 593 +2 508 639 266 329 462 590 671 206 591 205 345 449 363 461 253 501 387 604 434 598 388 385 681 646 +3 561 690 324 406 516 643 724 263 668 274 420 506 421 518 306 555 438 657 488 651 446 496 740 699 +4 614 741 382 483 570 696 777 320 745 343 495 563 479 575 359 609 489 710 542 704 504 607 799 752 +5 667 792 440 560 624 749 830 377 822 412 570 620 537 632 412 663 540 763 596 757 562 718 858 805 +6 720 843 498 637 678 802 883 434 899 481 645 677 595 689 465 717 591 816 650 810 620 829 917 858 +7 773 894 556 714 732 855 936 491 976 550 720 734 653 746 518 771 642 869 704 863 678 940 976 911 +8 826 945 614 791 786 908 989 548 1053 619 795 791 711 803 571 825 693 922 758 916 736 1051 1035 964 +9 879 996 672 868 840 961 1042 605 1130 688 870 848 769 860 624 879 744 975 812 969 794 1162 1094 1017 +10 932 1047 730 945 894 1014 1095 662 1207 757 945 905 827 917 677 933 795 1028 866 1022 852 1273 1153 1070 +11 985 1098 788 1022 948 1067 1148 719 1284 826 1020 962 885 974 730 987 846 1081 920 1075 910 1384 1212 1123 +12 1038 1149 846 1099 1002 1120 1201 776 1361 895 1095 1019 943 1031 783 1041 897 1134 974 1128 968 1495 1271 1176 +13 1091 1200 904 1176 1056 1173 1254 833 1438 964 1170 1076 1001 1088 836 1095 948 1187 1028 1181 1026 1606 1330 1229 +14 1144 1251 962 1253 1110 1226 1307 890 1515 1033 1245 1133 1059 1145 889 1149 999 1240 1082 1234 1084 1717 1389 1282 +15 1197 1302 1020 1330 1164 1279 1360 947 1592 1102 1320 1190 1117 1202 942 1203 1050 1293 1136 1287 1142 1828 1448 1335 diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/MIRU_table_0580 --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/MIRU_table_0580 Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,27 @@ +No. 0580 +0s 122 +0 175 +1s 199 +1 252 +2s 276 +2 329 +3s 353 +3 406 +4s 430 +4 483 +5s 507 +5 560 +6s 584 +6 637 +7s 661 +7 714 +8s 738 +8 791 +9s 815 +9 868 +10 945 +11 1022 +12 1099 +13 1176 +14 1253 +15 1330 diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/README.md --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/README.md Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,88 @@ +# MIRUReader + +## Description + +Identify 24-locus MIRU-VNTR for *Mycobacterium tuberculosis* complex (MTBC) directly from long reads generated by Oxford Nanopore Technologies (ONT) and Pacific Biosciences (PacBio). Also work on assembled genome. + +## Requirements + +* Linux +* primersearch from [EMBOSS](http://emboss.sourceforge.net/download/) + * install from the official website or + * install via conda `conda install -c bioconda emboss` + * Ensure the primersearch command is in your device's environment path, where primersearch program can be executed directly by typing `primersearch` on the commandline +* [*pandas*](https://pandas.pydata.org/) + * can be installed via conda `conda install pandas` or via PyPI `pip install pandas` +* [*statistics*](https://pypi.org/project/statistics/) + * can be installed via PyPI `pip install statistics` + +## Installation + +`git clone https://github.com/phglab/MIRUReader.git` + +## Change log +#### 13/09/2019 +- Added a check to ensure primersearch is executable prior to MIRUReader program execution +- Updated documentation to the README + +#### 04/07/2019 +- Update output format for option '--details'. + +#### 14/06/2019 +- Auto convert fastq to fasta. + +## Usage example + +For one sample analysis: +``` +python /your/path/to/MIRUReader.py -r sample.fasta -p sampleID > miru.txt +``` + +For multiple samples analysis: +1. Create a mapping file (mappingFile.txt) that looks like: + + sample_001.fasta sample_001 \ + sample_002.fasta sample_002 \ + ... + +2. Then run the program: +``` +cat mappingFile.txt | while read -a line; do python /your/path/to/MIRUReader.py -r ${line[0]} -p ${line[1]}; done > miru.multiple.txt +``` + +## Output example + +``` +sample_prefix 0154 0424 0577 0580 0802 0960 1644 1955 2059 2163b 2165 2347 2401 2461 2531 2687 2996 3007 3171 3192 3690 4052 4156 4348 +sample_001 2 4 4 2 3 3 3 2 2 5 4 4 4 2 5 1 6 3 3 5 3 7 2 3 +``` + +Notes: +* The program is compatible to Python 2 and Python 3. +* Accepted reads file format includes '.fastq', '.fastq.gz', '.fasta', and '.fasta.gz'. +* The program output is a tab-delimited plain text which can be copied to or opened in Excel spreadsheet. + +## Full usage + +| Main options | Description | +| ------------ | ----------- | +| -r READS | Input reads file in fastq/fasta format, can be gzipped or not gzipped | +| -p PREFIX | Sample ID required for naming output file. | +| --table TABLE | Allele calling table, default is MIRU_table. Can be user-defined in fixed format. However, providing custom allele calling table for other VNTR is not tested. | +| --primers PRIMERS | Primers sequences, default is MIRU_primers. Can be user-defined in fixed format. | + + +| Optional options | Description | +| ---------------- | ----------- | +| --amplicons | Use output from primersearch ("prefix.18.primersearch.out") and summarize MIRU profile directly. | +| --details | This option is for further inspection. It displays details of repeat count for each loci with total mismatch error in the primer sequences alignment. | +| --nofasta | Delete fasta file generated if your input read is in fastq format. | + +## FAQ +1. **Why are there two MIRU allele calling tables (MIRU_table and MIRU_table_0580)?** + +MIRU loci 0580 (MIRU_table_0580) consist of a different numbering system for determination of repeat numbers as compared to the other 23 MIRU locus (MIRU_table) for MTBC isolates. + + +## Troubleshooting +1. If an error message `OSError: primersearch is not found.` appears, please ensure your `primersearch` executable file is in your environment path (`echo $PATH`) and can be called directly. diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/tb_test.18.primersearch.out diff -r 000000000000 -r f0e3646a4e45 MIRUReader/tb_test.fasta --- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/MIRUReader/tb_test.fasta Tue Aug 17 19:15:15 2021 +0000 @@ -0,0 +1,55049 @@ +>AE000516.2 Mycobacterium tuberculosis CDC1551, complete genome +TTGACCGATGACCCCGGTTCAGGCTTCACCACAGTGTGGAACGCGGTCGTCTCCGAACTTAACGGCGACCCTAAGGTTGA +CGACGGACCCAGCAGTGATGCTAATCTCAGCGCTCCGCTGACCCCTCAGCAAAGGGCTTGGCTCAATCTCGTCCAGCCAT +TGACCATCGTCGAGGGGTTTGCTCTGTTATCCGTGCCGAGCAGCTTTGTCCAAAACGAAATCGAGCGCCATCTGCGGGCC +CCGATTACCGACGCTCTCAGCCGCCGACTCGGACATCAGATCCAACTCGGGGTCCGCATCGCTCCGCCGGCGACCGACGA +AGCCGACGACACTACCGTGCCGCCTTCCGAAAATCCTGCTACCACATCGCCAGACACCACAACCGACAACGACGAGATTG +ATGACAGCGCTGCGGCACGGGGCGATAACCAGCACAGTTGGCCAAGTTACTTCACCGAGCGCCCGCACAATACCGATTCC +GCTACCGCTGGCGTAACCAGCCTTAACCGTCGCTACACCTTTGATACGTTCGTTATCGGCGCCTCCAACCGGTTCGCGCA +CGCCGCCGCCTTGGCGATCGCAGAAGCACCCGCCCGCGCTTACAACCCCCTGTTCATCTGGGGCGAGTCCGGTCTCGGCA +AGACACACCTGCTACACGCGGCAGGCAACTATGCCCAACGGTTGTTCCCGGGAATGCGGGTCAAATATGTCTCCACCGAG +GAATTCACCAACGACTTCATTAACTCGCTCCGCGATGACCGCAAGGTCGCATTCAAACGCAGCTACCGCGACGTAGACGT +GCTGTTGGTCGACGACATCCAATTCATTGAAGGCAAAGAGGGTATTCAAGAGGAGTTCTTCCACACCTTCAACACCTTGC +ACAATGCCAACAAGCAAATCGTCATCTCATCTGACCGCCCACCCAAGCAGCTCGCCACCCTCGAGGACCGGCTGAGAACC +CGCTTTGAGTGGGGGCTGATCACTGACGTACAACCACCCGAGCTGGAGACCCGCATCGCCATCTTGCGCAAGAAAGCACA +GATGGAACGGCTCGCGGTCCCCGACGATGTCCTCGAACTCATCGCCAGCAGTATCGAACGCAATATCCGTGAACTCGAGG +GCGCGCTGATCCGGGTCACCGCGTTCGCCTCATTGAACAAAACACCAATCGACAAAGCGCTGGCCGAGATTGTGCTTCGC +GATCTGATCGCCGACGCCAACACCATGCAAATCAGCGCGGCGACGATCATGGCTGCCACCGCCGAATACTTCGACACTAC +CGTCGAAGAGCTTCGCGGGCCCGGCAAGACCCGAGCACTGGCCCAGTCACGACAGATTGCGATGTACCTGTGTCGTGAGC 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