Mercurial > repos > greg > vsnp_add_zero_coverage
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observing the deviation between RPL and RPR given E(RPL/RPR) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=RPPR,Number=1,Type=Float,Description="Read Placement Probability for reference observations: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between RPL and RPR given E(RPL/RPR) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=RPL,Number=A,Type=Float,Description="Reads Placed Left: number of reads supporting the alternate balanced to the left (5') of the alternate allele"> +##INFO=<ID=RPR,Number=A,Type=Float,Description="Reads Placed Right: number of reads supporting the alternate balanced to the right (3') of the alternate allele"> +##INFO=<ID=EPP,Number=A,Type=Float,Description="End Placement Probability: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between EL and ER given E(EL/ER) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=EPPR,Number=1,Type=Float,Description="End Placement Probability for reference observations: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between EL and ER given E(EL/ER) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=DPRA,Number=A,Type=Float,Description="Alternate allele depth ratio. Ratio between depth in samples with each called alternate allele and those without."> +##INFO=<ID=ODDS,Number=1,Type=Float,Description="The log odds ratio of the best genotype combination to the second-best."> +##INFO=<ID=GTI,Number=1,Type=Integer,Description="Number of genotyping iterations required to reach convergence or bailout."> +##INFO=<ID=TYPE,Number=A,Type=String,Description="The type of allele, either snp, mnp, ins, del, or complex."> +##INFO=<ID=CIGAR,Number=A,Type=String,Description="The extended CIGAR representation of each alternate allele, with the exception that '=' is replaced by 'M' to ease VCF parsing. Note that INDEL alleles do not have the first matched base (which is provided by default, per the spec) referred to by the CIGAR."> +##INFO=<ID=NUMALT,Number=1,Type=Integer,Description="Number of unique non-reference alleles in called genotypes at this position."> +##INFO=<ID=MEANALT,Number=A,Type=Float,Description="Mean number of unique non-reference allele observations per sample with the corresponding alternate alleles."> +##INFO=<ID=LEN,Number=A,Type=Integer,Description="allele length"> +##INFO=<ID=MQM,Number=A,Type=Float,Description="Mean mapping quality of observed alternate alleles"> +##INFO=<ID=MQMR,Number=1,Type=Float,Description="Mean mapping quality of observed reference alleles"> +##INFO=<ID=PAIRED,Number=A,Type=Float,Description="Proportion of observed alternate alleles which are supported by properly paired read fragments"> +##INFO=<ID=PAIREDR,Number=1,Type=Float,Description="Proportion of observed reference alleles which are supported by properly paired read fragments"> +##INFO=<ID=MIN_DP,Number=1,Type=Integer,Description="Minimum depth in gVCF output block."> +##INFO=<ID=END,Number=1,Type=Integer,Description="Last position (inclusive) in gVCF output record."> +##INFO=<ID=technology.ILLUMINA,Number=A,Type=Float,Description="Fraction of observations supporting the alternate observed in reads from ILLUMINA"> +##FORMAT=<ID=GT,Number=1,Type=String,Description="Genotype"> +##FORMAT=<ID=GQ,Number=1,Type=Float,Description="Genotype Quality, the Phred-scaled marginal (or unconditional) probability of the called genotype"> +##FORMAT=<ID=GL,Number=G,Type=Float,Description="Genotype Likelihood, log10-scaled likelihoods of the data given the called genotype for each possible genotype generated from the reference and alternate alleles given the sample ploidy"> +##FORMAT=<ID=DP,Number=1,Type=Integer,Description="Read Depth"> +##FORMAT=<ID=AD,Number=R,Type=Integer,Description="Number of observation for each allele"> +##FORMAT=<ID=RO,Number=1,Type=Integer,Description="Reference allele observation count"> +##FORMAT=<ID=QR,Number=1,Type=Integer,Description="Sum of quality of the reference observations"> +##FORMAT=<ID=AO,Number=A,Type=Integer,Description="Alternate allele observation count"> +##FORMAT=<ID=QA,Number=A,Type=Integer,Description="Sum of quality of the alternate observations"> +##FORMAT=<ID=MIN_DP,Number=1,Type=Integer,Description="Minimum depth in gVCF output block."> +#CHROM POS ID REF ALT QUAL FILTER INFO FORMAT 13-1941-6 +NC_002945.4 1 . 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--- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/test-data/vcf_input.vcf Tue Apr 21 09:44:38 2020 -0400 @@ -0,0 +1,64 @@ +##fileformat=VCFv4.2 +##fileDate=20200302 +##source=freeBayes v1.3.1-dirty +##reference=/home/galaxy/galaxy/tool-data/AF2122/seq/AF2122.fa +##contig=<ID=NC_002945.4,length=4349904> +##phasing=none +##commandline="freebayes --region NC_002945.4:0..4349904 --bam b_0.bam --fasta-reference /home/galaxy/galaxy/tool-data/AF2122/seq/AF2122.fa --vcf ./vcf_output/part_NC_002945.4:0..4349904.vcf -u -n 0 --haplotype-length -1 --min-repeat-size 5 --min-repeat-entropy 1 -m 1 -q 0 -R 0 -Y 0 -e 1 -F 0.05 -C 2 -G 1 --min-alternate-qsum 0" +##filter="QUAL > 0" +##INFO=<ID=NS,Number=1,Type=Integer,Description="Number of samples with data"> +##INFO=<ID=DP,Number=1,Type=Integer,Description="Total read depth at the locus"> +##INFO=<ID=DPB,Number=1,Type=Float,Description="Total read depth per bp at the locus; bases in reads overlapping / bases in haplotype"> 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+##INFO=<ID=PQR,Number=1,Type=Float,Description="Reference allele quality sum in phred for partial observations"> +##INFO=<ID=PQA,Number=A,Type=Float,Description="Alternate allele quality sum in phred for partial observations"> +##INFO=<ID=SRF,Number=1,Type=Integer,Description="Number of reference observations on the forward strand"> +##INFO=<ID=SRR,Number=1,Type=Integer,Description="Number of reference observations on the reverse strand"> +##INFO=<ID=SAF,Number=A,Type=Integer,Description="Number of alternate observations on the forward strand"> +##INFO=<ID=SAR,Number=A,Type=Integer,Description="Number of alternate observations on the reverse strand"> +##INFO=<ID=SRP,Number=1,Type=Float,Description="Strand balance probability for the reference allele: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between SRF and SRR given E(SRF/SRR) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=SAP,Number=A,Type=Float,Description="Strand balance 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observing the deviation between RPL and RPR given E(RPL/RPR) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=RPPR,Number=1,Type=Float,Description="Read Placement Probability for reference observations: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between RPL and RPR given E(RPL/RPR) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=RPL,Number=A,Type=Float,Description="Reads Placed Left: number of reads supporting the alternate balanced to the left (5') of the alternate allele"> +##INFO=<ID=RPR,Number=A,Type=Float,Description="Reads Placed Right: number of reads supporting the alternate balanced to the right (3') of the alternate allele"> +##INFO=<ID=EPP,Number=A,Type=Float,Description="End Placement Probability: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between EL and ER given E(EL/ER) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=EPPR,Number=1,Type=Float,Description="End Placement Probability for reference observations: Phred-scaled upper-bounds estimate of the probability of observing the deviation between EL and ER given E(EL/ER) ~ 0.5, derived using Hoeffding's inequality"> +##INFO=<ID=DPRA,Number=A,Type=Float,Description="Alternate allele depth ratio. 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--- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/vsnp_add_zero_coverage.py Tue Apr 21 09:44:38 2020 -0400 @@ -0,0 +1,191 @@ +#!/usr/bin/env python + +import argparse +import multiprocessing +import os +import pandas +import pysam +import queue +import re +import shutil +from numpy import mean +from Bio import SeqIO + +INPUT_BAM_DIR = 'input_bam_dir' +INPUT_VCF_DIR = 'input_vcf_dir' +OUTPUT_VCF_DIR = 'output_vcf_dir' +OUTPUT_METRICS_DIR = 'output_metrics_dir' + + +def get_base_file_name(file_path): + base_file_name = os.path.basename(file_path) + if base_file_name.find(".") > 0: + # Eliminate the extension. + return os.path.splitext(base_file_name)[0] + elif base_file_name.find("_") > 0: + # The dot extension was likely changed to + # the " character. + items = base_file_name.split("_") + return "_".join(items[0:-1]) + else: + return base_file_name + + +def get_coverage_and_snp_count(task_queue, reference, output_metrics, output_vcf, timeout): + while True: + try: + tup = task_queue.get(block=True, timeout=timeout) + except queue.Empty: + break + bam_file, vcf_file = tup + # Create a coverage dictionary. + coverage_dict = {} + coverage_list = pysam.depth(bam_file, split_lines=True) + for line in coverage_list: + chrom, position, depth = line.split('\t') + coverage_dict["%s-%s" % (chrom, position)] = depth + # Convert it to a data frame. + coverage_df = pandas.DataFrame.from_dict(coverage_dict, orient='index', columns=["depth"]) + # Create a zero coverage dictionary. + zero_dict = {} + for record in SeqIO.parse(reference, "fasta"): + chrom = record.id + total_len = len(record.seq) + for pos in list(range(1, total_len + 1)): + zero_dict["%s-%s" % (str(chrom), str(pos))] = 0 + # Convert it to a data frame with depth_x + # and depth_y columns - index is NaN. + zero_df = pandas.DataFrame.from_dict(zero_dict, orient='index', columns=["depth"]) + coverage_df = zero_df.merge(coverage_df, left_index=True, right_index=True, how='outer') + # depth_x "0" column no longer needed. + coverage_df = coverage_df.drop(columns=['depth_x']) + coverage_df = coverage_df.rename(columns={'depth_y': 'depth'}) + # Covert the NaN to 0 coverage and get some metrics. + coverage_df = coverage_df.fillna(0) + coverage_df['depth'] = coverage_df['depth'].apply(int) + total_length = len(coverage_df) + average_coverage = coverage_df['depth'].mean() + zero_df = coverage_df[coverage_df['depth'] == 0] + total_zero_coverage = len(zero_df) + total_coverage = total_length - total_zero_coverage + genome_coverage = "{:.2%}".format(total_coverage / total_length) + # Process the associated VCF input. + column_names = ["CHROM", "POS", "ID", "REF", "ALT", "QUAL", "FILTER", "INFO", "FORMAT", "Sample"] + vcf_df = pandas.read_csv(vcf_file, sep='\t', header=None, names=column_names, comment='#') + good_snp_count = len(vcf_df[(vcf_df['ALT'].str.len() == 1) & (vcf_df['REF'].str.len() == 1) & (vcf_df['QUAL'] > 150)]) + base_file_name = get_base_file_name(vcf_file) + if total_zero_coverage > 0: + header_file = "%s_header.csv" % base_file_name + with open(header_file, 'w') as outfile: + with open(vcf_file) as infile: + for line in infile: + if re.search('^#', line): + outfile.write("%s" % line) + vcf_df_snp = vcf_df[vcf_df['REF'].str.len() == 1] + vcf_df_snp = vcf_df_snp[vcf_df_snp['ALT'].str.len() == 1] + vcf_df_snp['ABS_VALUE'] = vcf_df_snp['CHROM'].map(str) + "-" + vcf_df_snp['POS'].map(str) + vcf_df_snp = vcf_df_snp.set_index('ABS_VALUE') + cat_df = pandas.concat([vcf_df_snp, zero_df], axis=1, sort=False) + cat_df = cat_df.drop(columns=['CHROM', 'POS', 'depth']) + cat_df[['ID', 'ALT', 'QUAL', 'FILTER', 'INFO']] = cat_df[['ID', 'ALT', 'QUAL', 'FILTER', 'INFO']].fillna('.') + cat_df['REF'] = cat_df['REF'].fillna('N') + cat_df['FORMAT'] = cat_df['FORMAT'].fillna('GT') + cat_df['Sample'] = cat_df['Sample'].fillna('./.') + cat_df['temp'] = cat_df.index.str.rsplit('-', n=1) + cat_df[['CHROM', 'POS']] = pandas.DataFrame(cat_df.temp.values.tolist(), index=cat_df.index) + cat_df = cat_df[['CHROM', 'POS', 'ID', 'REF', 'ALT', 'QUAL', 'FILTER', 'INFO', 'FORMAT', 'Sample']] + cat_df['POS'] = cat_df['POS'].astype(int) + cat_df = cat_df.sort_values(['CHROM', 'POS']) + body_file = "%s_body.csv" % base_file_name + cat_df.to_csv(body_file, sep='\t', header=False, index=False) + if output_vcf is None: + output_vcf_file = os.path.join(OUTPUT_VCF_DIR, "%s.vcf" % base_file_name) + else: + output_vcf_file = output_vcf + with open(output_vcf_file, "w") as outfile: + for cf in [header_file, body_file]: + with open(cf, "r") as infile: + for line in infile: + outfile.write("%s" % line) + else: + if output_vcf is None: + output_vcf_file = os.path.join(OUTPUT_VCF_DIR, "%s.vcf" % base_file_name) + else: + output_vcf_file = output_vcf + shutil.copyfile(vcf_file, output_vcf_file) + bam_metrics = [base_file_name, "", "%4f" % average_coverage, genome_coverage] + vcf_metrics = [base_file_name, str(good_snp_count), "", ""] + if output_metrics is None: + output_metrics_file = os.path.join(OUTPUT_METRICS_DIR, "%s.tabular" % base_file_name) + else: + output_metrics_file = output_metrics + metrics_columns = ["File", "Number of Good SNPs", "Average Coverage", "Genome Coverage"] + with open(output_metrics_file, "w") as fh: + fh.write("# %s\n" % "\t".join(metrics_columns)) + fh.write("%s\n" % "\t".join(bam_metrics)) + fh.write("%s\n" % "\t".join(vcf_metrics)) + task_queue.task_done() + + +def set_num_cpus(num_files, processes): + num_cpus = int(multiprocessing.cpu_count()) + if num_files < num_cpus and num_files < processes: + return num_files + if num_cpus < processes: + half_cpus = int(num_cpus / 2) + if num_files < half_cpus: + return num_files + return half_cpus + return processes + + +if __name__ == '__main__': + parser = argparse.ArgumentParser() + + parser.add_argument('--output_metrics', action='store', dest='output_metrics', required=False, default=None, help='Output metrics text file') + parser.add_argument('--output_vcf', action='store', dest='output_vcf', required=False, default=None, help='Output VCF file') + parser.add_argument('--reference', action='store', dest='reference', help='Reference dataset') + parser.add_argument('--processes', action='store', dest='processes', type=int, help='User-selected number of processes to use for job splitting') + + args = parser.parse_args() + + # The assumption here is that the list of files + # in both INPUT_BAM_DIR and INPUT_VCF_DIR are + # equal in number and named such that they are + # properly matched if the directories contain + # more than 1 file (i.e., hopefully the bam file + # names and vcf file names will be something like + # Mbovis-01D6_* so they can be # sorted and properly + # associated with each other). + bam_files = [] + for file_name in sorted(os.listdir(INPUT_BAM_DIR)): + file_path = os.path.abspath(os.path.join(INPUT_BAM_DIR, file_name)) + bam_files.append(file_path) + vcf_files = [] + for file_name in sorted(os.listdir(INPUT_VCF_DIR)): + file_path = os.path.abspath(os.path.join(INPUT_VCF_DIR, file_name)) + vcf_files.append(file_path) + + multiprocessing.set_start_method('spawn') + queue1 = multiprocessing.JoinableQueue() + num_files = len(bam_files) + cpus = set_num_cpus(num_files, args.processes) + # Set a timeout for get()s in the queue. + timeout = 0.05 + + # Add each associated bam and vcf file pair to the queue. + for i, bam_file in enumerate(bam_files): + vcf_file = vcf_files[i] + queue1.put((bam_file, vcf_file)) + + # Complete the get_coverage_and_snp_count task. + processes = [multiprocessing.Process(target=get_coverage_and_snp_count, args=(queue1, args.reference, args.output_metrics, args.output_vcf, timeout, )) for _ in range(cpus)] + for p in processes: + p.start() + for p in processes: + p.join() + queue1.join() + + if queue1.empty(): + queue1.close() + queue1.join_thread()
--- /dev/null Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000 +++ b/vsnp_add_zero_coverage.xml Tue Apr 21 09:44:38 2020 -0400 @@ -0,0 +1,175 @@ +<tool id="vsnp_add_zero_coverage" name="vSNP: add zero coverage" version="1.0.0"> + <description></description> + <requirements> + <requirement type="package" version="1.76">biopython</requirement> + <requirement type="package" version="1.16.5">numpy</requirement> + <requirement type="package" version="0.25.3">pandas</requirement> + <requirement type="package" version="0.15.4">pysam</requirement> + </requirements> + <command detect_errors="exit_code"><![CDATA[ +#import os +#import re +#set input_type = $input_type_cond.input_type +#set input_bam_dir = 'input_bam_dir' +#set input_vcf_dir = 'input_vcf_dir' +#set output_vcf_dir = 'output_vcf_dir' +#set output_metrics_dir = 'output_metrics_dir' +mkdir -p $input_bam_dir && +mkdir -p $input_vcf_dir && +mkdir -p $output_vcf_dir && +mkdir -p $output_metrics_dir && +#if str($input_type) == "single": + #set bam_input = $input_type_cond.bam_input + #set file_name = $bam_input.file_name + #set file_name_base = $os.path.basename($file_name) + ln -s $file_name $input_bam_dir/$file_name_base && + #set vcf_input = $input_type_cond.vcf_input + #set file_name = $vcf_input.file_name + #set file_name_base = $os.path.basename($file_name) + ln -s $file_name $input_vcf_dir/$file_name_base && +#else: + #for $i in $input_type_cond.bam_input_collection: + #set filename = $i.file_name + #set identifier = re.sub('[^\s\w\-]', '_', str($i.element_identifier)) + ln -s $filename $input_bam_dir/$identifier && + #end for + #for $i in $input_type_cond.vcf_input_collection: + #set filename = $i.file_name + #set identifier = re.sub('[^\s\w\-]', '_', str($i.element_identifier)) + ln -s $filename $input_vcf_dir/$identifier && + #end for +#end if +python '$__tool_directory__/vsnp_add_zero_coverage.py' +--processes $processes +#if str($reference_cond.reference_source) == "cached" + --reference '$reference_cond.reference.fields.path' +#else: + --reference '$reference_cond.reference' +#end if +#if str($input_type) == "single": + --output_metrics '$output_metrics' + --output_vcf '$output_vcf' +#end if +]]></command> + <inputs> + <conditional name="input_type_cond"> + <param name="input_type" type="select" label="Choose the category of the files to be analyzed"> + <option value="single" selected="true">Single files</option> + <option value="collection">Collections of files</option> + </param> + <when value="single"> + <param name="bam_input" type="data" format="bam" label="BAM file"> + <validator type="unspecified_build"/> + </param> + <param name="vcf_input" type="data" format="vcf" label="VCF file"> + <validator type="unspecified_build"/> + </param> + </when> + <when value="collection"> + <param name="bam_input_collection" type="data_collection" format="bam" collection_type="list" label="Collection of BAM files"> + <validator type="unspecified_build"/> + </param> + <param name="vcf_input_collection" type="data_collection" format="vcf" collection_type="list" label="Collection of VCF files"> + <validator type="unspecified_build"/> + </param> + </when> + </conditional> + <conditional name="reference_cond"> + <param name="reference_source" type="select" label="Choose the source for the reference genome"> + <option value="cached" selected="true">locally cached</option> + <option value="history">from history</option> + </param> + <when value="cached"> + <param name="reference" type="select" label="Using reference genome"> + <options from_data_table="fasta_indexes"/> + <!-- No <filter> tag here! --> + <validator type="no_options" message="A built-in reference genome is not available for the build associated with the selected BAM file"/> + </param> + </when> + <when value="history"> + <param name="reference" type="data" format="fasta" label="Using reference genome"> + <validator type="no_options" message="The current history does not include a fasta dataset"/> + </param> + </when> + </conditional> + <param name="processes" type="integer" min="1" max="20" value="8" label="Number of processes for job splitting"/> + </inputs> + <outputs> + <data name="output_vcf" format="vcf" label="${tool.name} (filtered VCF) on ${on_string}"> + <filter>input_type_cond['input_type'] == 'single'</filter> + </data> + <collection name="output_vcf_collection" type="list" label="${tool.name} (filtered VCFs) on ${on_string}"> + <discover_datasets pattern="__name__" directory="output_vcf_dir" format="vcf" /> + <filter>input_type_cond['input_type'] == 'collection'</filter> + </collection> + <data name="output_metrics" format="tabular" label="${tool.name} (metrics) on ${on_string}"> + <filter>input_type_cond['input_type'] == 'single'</filter> + </data> + <collection name="output_metrics_collection" type="list" label="${tool.name} (metrics) on ${on_string}"> + <discover_datasets pattern="__name__" directory="output_metrics_dir" format="tabular" /> + <filter>input_type_cond['input_type'] == 'collection'</filter> + </collection> + </outputs> + <tests> + <test> + <param name="input_type" value="collection"/> + <param name="bam_input_collection"> + <collection type="list"> + <element name="bam_input.bam" value="bam_input.bam" dbkey="89"/> + <element name="bam_input2.bam" value="bam_input2.bam" dbkey="89"/> + </collection> + </param> + <param name="vcf_input_collection"> + <collection type="list"> + <element name="vcf_input.vcf" value="vcf_input.vcf" dbkey="89"/> + <element name="vcf_input2.vcf" value="vcf_input2.vcf" dbkey="89"/> + </collection> + </param> + <param name="reference_source" value="history"/> + <param name="reference" value="NC_002945v4.fasta" ftype="fasta"/> + <output_collection name="output_vcf_collection" type="list"> + <element name="vcf_input.vcf" file="output_vcf.vcf" ftype="vcf" compare="contains"/> + <element name="vcf_input2.vcf" file="output_vcf.vcf" ftype="vcf" compare="contains"/> + </output_collection> + <output_collection name="output_metrics_collection" type="list"> + <element name="vcf_input.tabular" file="output_metrics.tabular" ftype="tabular" compare="contains"/> + <element name="vcf_input2.tabular" file="output_metrics.tabular" ftype="tabular" compare="contains"/> + </output_collection> + </test> + <test> + <param name="bam_input" value="bam_input.bam" ftype="bam" dbkey="89"/> + <param name="vcf_input" value="vcf_input.vcf" ftype="vcf" dbkey="89"/> + <param name="reference_source" value="history"/> + <param name="reference" value="NC_002945v4.fasta" ftype="fasta"/> + <param name="output_vcf" value="output_vcf.vcf" ftype="vcf" compare="contains"/> + <output name="output_metrics" file="output_metrics.tabular" ftype="tabular" compare="contains"/> + </test> + </tests> + <help> +**What it does** + +Accepts a combination of single BAM and associated VCF files (or associated collections of each) to produce a VCF file for each +combination whose positions with no coverage are represented as "N". These outputs are restricted to SNPs and those regions +along the reference with no coverage. + +A metrics file is produced for each combination which provides the number of good SNPs, the average coverage and the genome +coverage percentage. + +**Required Options** + + * **Choose the category of the files to be analyzed** - select "Single files" or "Collections of files", then select the appropriate history items (single BAM and VCF files or collections of BAM and VCF files) based on the selected option. + * **Choose the source for the reference genome** - select "locally cached" if the reference associated with the BAM and VCF files is available within the Galaxy environment or "from history" to select the reference from the current history. + * **Number of processes for job splitting** - Select the number of processes for splitting the job to shorten execution time. + </help> + <citations> + <citation type="bibtex"> + @misc{None, + journal = {None}, + author = {1. Stuber T}, + title = {Manuscript in preparation}, + year = {None}, + url = {https://github.com/USDA-VS/vSNP},} + </citation> + </citations> +</tool> +