--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/all_fasta.loc.sample	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,18 @@
+#This file lists the locations and dbkeys of all the fasta files
+#under the "genome" directory (a directory that contains a directory
+#for each build). The script extract_fasta.py will generate the file
+#all_fasta.loc. This file has the format (white space characters are
+#TAB characters):
+#
+#<unique_build_id>	<dbkey>	<display_name>	<file_path>
+#
+#So, all_fasta.loc could look something like this:
+#
+#apiMel3	apiMel3	Honeybee (Apis mellifera): apiMel3	/path/to/genome/apiMel3/apiMel3.fa
+#hg19canon	hg19	Human (Homo sapiens): hg19 Canonical	/path/to/genome/hg19/hg19canon.fa
+#hg19full	hg19	Human (Homo sapiens): hg19 Full	/path/to/genome/hg19/hg19full.fa
+#
+#Your all_fasta.loc file should contain an entry for each individual
+#fasta file. So there will be multiple fasta files for each build,
+#such as with hg19 above.
+#

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/macros.xml	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,64 @@
+<macros>
+    <token name="@TOOL_VERSION@">0.1.6</token>
+    <xml name="requirements">
+        <requirements>
+            <yield/>
+        </requirements>
+    </xml>
+    <xml name="citations">
+        <citations>
+            <citation type="bibtex">@online{nextclade,
+                title={nextclade},
+                year = 2021,
+                url = {https://github.com/nextstrain/nextclade},
+                urldate = {2021-03-26}
+                }
+            </citation>
+            <yield />
+        </citations>
+    </xml>
+
+    <!--
+        command
+    -->
+    <token name="@REF_FASTA@"><![CDATA[
+    #if $reference_source.reference_source_selector == 'history':
+        ln -f -s '$reference_source.ref_file' reference.fa &&
+    #else:
+        ln -f -s '$reference_source.ref_file.fields.path' reference.fa &&
+    #end if
+]]></token>
+
+    <!--
+        inputs
+    -->
+
+    <xml name="reference">
+        <conditional name="reference_source">
+            <param name="reference_source_selector" type="select" label="Choose the source for the reference genome">
+                <option value="cached">Use a built-in genome</option>
+                <option value="history">Use a genome from history</option>
+            </param>
+            <when value="cached">
+                <param name="ref_file" type="select" label="Using reference genome" help="Select genome from the list">
+                    <options from_data_table="all_fasta">
+                        <filter type="sort_by" column="2"/>
+                    </options>
+                    <validator type="no_options" message="A built-in reference genome is not available for the build associated with the selected input file"/>
+                </param>
+            </when>
+            <when value="history">
+                <param name="ref_file" type="data" format="fasta" label="Use the following dataset as the reference sequence" help="You can upload a FASTA sequence to the history and use it as reference"/>
+            </when>
+        </conditional>
+    </xml>
+
+    <!--
+        help
+    -->
+    <token name="@NEXTCLADE@"><![CDATA[
+Nextclade is a tool that identifies differences between your sequences and a reference sequence, uses these differences to assign your sequences to clades, and reports potential sequence quality issues in your data.
+You can use the tool to analyze sequences before you upload them to a database, or if you want to assign Nextstrain clades to a set of sequences.
+]]></token>
+
+</macros>
\ No newline at end of file

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/nextalign.xml	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,203 @@
+<tool id="nextalign" name="NextAlign" version="@TOOL_VERSION@+galaxy0" profile="20.01">
+    <macros>
+        <import>macros.xml</import>
+    </macros>
+    <expand macro="requirements">
+        <requirement type="package" version="@TOOL_VERSION@">nextalign</requirement>
+    </expand>
+    <version_command>nextalign --version-detailed</version_command>
+    <command detect_errors="exit_code"><![CDATA[
+@REF_FASTA@
+ln -s '$sequences' sequences.fasta &&
+nextalign
+    --sequences sequences.fasta
+    --reference reference.fa
+    --output-fasta '$output_fasta'
+#if $output_insertions:
+    --output-insertions '$output_csv'
+#end if
+#if $translation.translation_select == "yes":
+    --genes '${translation.genes}'
+    --genemap '${translation.genemap}'
+#end if
+    --min-length '${min_length}'
+    --penalty-gap-extend '${penalty_gap_extend}'
+    --penalty-gap-open '${penalty_gap_open}'
+    --penalty-gap-open-in-frame '${penalty_gap_open_in_frame}'
+    --penalty-gap-open-out-of-frame '${penalty_gap_open_out_of_frame}'
+    --penalty-mismatch '${penalty_mismatch}'
+    --score-match '${score_match}'
+    --max-indel '${max_indel}'
+    --nuc-seed-length '${nuc_seed_length}'
+    --nuc-min-seeds '${nuc_min_seeds}'
+    --nuc-seed-spacing '${nuc_seed_spacing}'
+    --nuc-mismatches-allowed '${nuc_mismatches_allowed}'
+    --aa-seed-length '${aa_seed_length}'
+    --aa-min-seeds '${aa_min_seeds}'
+    --aa-seed-spacing '${aa_seed_spacing}'
+    --aa-mismatches-allowed '${aa_mismatches_allowed}'
+    ]]></command>
+    <inputs>
+        <expand macro="reference"/>
+        <param argument="--sequences" type="data" format="fasta" label="FASTA file with input sequences"/>
+        <param argument="--output-insertions" type="boolean" checked="true" label="Output insertion sequences?" help="Outputs stripped insertions relative to reference as CSV"/>
+        <conditional name="translation">
+            <param name="translation_select" type="select" label="Translate annotated genes based on GFF and gene list?">
+                <option value="yes">Translate annotated genes</option>
+                <option value="no">Don't translate genes</option>
+            </param>
+            <when value="yes">
+                <param argument="--genes" type="text" label="Comma separated list of genes to translate.">
+                    <sanitizer invalid_char="">
+                        <valid initial="string.ascii_letters,string.digits">
+                            <add value="-" />
+                            <add value="." />
+                            <add value="," />
+                        </valid>
+                    </sanitizer>
+                </param>
+                <param argument="--genemap" type="data" format="gtf" label="GTF file containing custom gene map"/> <!-- TODO - make sure they need GFF and not GTF or GFF3 -->
+            </when>
+            <when value="no"/>
+        </conditional>
+        <param argument="--min-length" type="integer" value="100" min="0"
+            label="Minimum length of nucleotide sequence to consider for alignment"
+            help=" If a sequence is shorter than that, alignment will not be attempted and a warning will be emitted. When adjusting this parameter, note that alignment of short sequences can be unreliable." />
+        <param argument="--penalty-gap-extend" type="integer" value="0"
+            label="Penalty for extending a gap."
+            help="If zero, all gaps regardless of length incur the same penalty." />
+        <param argument="--penalty-gap-open" type="integer" value="6"
+            label="Penalty for opening of a gap."
+            help="A higher penalty results in fewer gaps and more mismatches. Should be less than the penalty value of opening a gap in frame to avoid gaps in genes." />
+        <param argument="--penalty-gap-open-in-frame" type="integer" value="7" min="1" 
+            label="Penalty for opening gaps at the beginning of a codon." 
+            help="Should be greater than the penalty of opening a and less than penalty of opening a gap out of frame, to avoid gaps in genes, but favor gaps that align with codons." />
+        <param argument="--penalty-gap-open-out-of-frame" type="integer" value="8" min="1"
+            label="Penalty for opening gaps in the body of a codon." 
+            help="Should be greater than the penalty for opening gaps in-frame to favor gaps that align with codons." />
+        <param argument="--penalty-mismatch" type="integer" value="1" min="1"
+            label="Penalty for aligned nucleotides or aminoacids that differ in state during alignment"
+            help="Note that this is redundantly parameterized with score match." />
+        <param argument="--score-match" type="integer" value="3" min="1"
+            label="Score for encouraging aligned nucelotides or aminoacids with matching state."
+            help="Note that this is redundantly parameterized with mismatch penalty." />
+        <param argument="--max-indel" type="integer" value="400" min="0"
+            label="Maximum length of insertions or deletions allowed to proceed with alignment."
+            help="Alignments with long indels are slow to compute and require substantial memory in the current implementation. Alignment of sequences with indels that are longer than this value will not be attempted and a warning will be emitted." />
+        <param argument="--nuc-seed-length" type="integer" value="21" min="1"
+            label="Seed length for nucleotide alignment."
+            help="Seeds should be long enough to be unique, but short enough to match with high probability." />
+        <param argument="--nuc-min-seeds" type="integer" value="10" min="1"
+            label="Minimum number of seeds to search for during nucleotide alignment."
+            help="Relevant for short sequences. In long sequences, the number of seeds is determined by nucleotide seed spacing. This should be a positive integer." />
+        <param argument="--nuc-seed-spacing" type="integer" value="100" min="0"
+            label="Spacing between seeds during nucleotide alignment." />
+        <param argument="--nuc-mismatches-allowed" type="integer" value="3" min="0"
+            label="Maximum number of mismatching nucleotides."
+            help="Maximum number of mismatching nucleotides allowed for a seed to be considered a match." />
+        <param argument="--aa-seed-length" type="integer" value="12" min="1"
+            label="Seed length for aminoacid alignment" />
+        <param argument="--aa-min-seeds" type="integer" value="10" min="1"
+            label="Minimum number of seeds to search for during aminoacid alignment."
+            help="Relevant for short sequences. In long sequences, the number of seeds is determined by the aminoacid seed spacing." />
+        <param argument="--aa-seed-spacing" type="integer" value="100" min="0"
+            label="Spacing between seeds during aminoacid alignment." />
+        <param argument="--aa-mismatches-allowed" type="integer" value="2" min="0"
+            label="Maximum number of mismatching aminoacids."
+            help="Maximum number of mismatching aminoacids allowed for a seed to be considered a match." />
+    </inputs>
+    <outputs>
+        <data name="output_fasta" format="fasta" label="${tool.name} on ${on_string} (FASTA)"/>
+        <data name="output_csv" format="csv" label="${tool.name} on ${on_string} (CSV)">
+            <filter>output_insertions</filter>
+        </data>
+        <collection name="translations" type="list" label="${tool.name} on ${on_string} - Translations (FASTA)">
+            <discover_datasets pattern="sequences\.gene\.(?P&lt;designation&gt;[a-zA-Z0-9\-]+)\.fasta" format="fasta"/>
+            <filter>translation['translation_select'] == 'yes'</filter>
+        </collection>
+    </outputs>
+    <tests>
+        <!--
+            Defaults, all outputs, reference from history
+        -->
+        <test expect_num_outputs="3">
+            <conditional name="reference_source">
+                <param name="reference_source_selector" value="history"/>
+                <param name="ref_file" value="reference.fasta"/>
+            </conditional>
+            <param name="output_insertions" value="true"/>
+            <param name="sequences" value="subsampled.fasta"/>
+            <conditional name="translation">
+                <param name="translation_select" value="yes"/>
+                <param name="genes" value="E,M,N,ORF10,ORF14,ORF1a,ORF1b,ORF3a,ORF6,ORF7a,ORF7b,ORF8,ORF9b,S"/>
+                <param name="genemap" value="genemap.gtf" ftype="gtf"/>
+            </conditional>
+            <output name="output_fasta" file="output.fasta" sort="true"/>
+            <output name="output_csv" file="insertions.csv" sort="true"/>
+            <output_collection name="translations" type="list" count="14">
+                <element name="E" file="subsampled.gene.E.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="M" file="subsampled.gene.M.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="N" file="subsampled.gene.N.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF10" file="subsampled.gene.ORF10.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF14" file="subsampled.gene.ORF14.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF1a" file="subsampled.gene.ORF1a.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF1b" file="subsampled.gene.ORF1b.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF3a" file="subsampled.gene.ORF3a.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF6" file="subsampled.gene.ORF6.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF7a" file="subsampled.gene.ORF7a.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF7b" file="subsampled.gene.ORF7b.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF8" file="subsampled.gene.ORF8.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="ORF9b" file="subsampled.gene.ORF9b.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+                <element name="S" file="subsampled.gene.S.fasta" ftype="fasta" sort="true"/>
+            </output_collection>
+        </test>
+        <!--
+            Defaults, only fasta output, reference from history
+        -->
+        <test expect_num_outputs="1">
+            <conditional name="reference_source">
+                <param name="reference_source_selector" value="history"/>
+                <param name="ref_file" value="reference.fasta"/>
+            </conditional>
+            <param name="output_insertions" value="false"/>
+            <param name="sequences" value="subsampled.fasta"/>
+            <conditional name="translation">
+                <param name="translation_select" value="no"/>
+            </conditional>
+            <output name="output_fasta" file="output.fasta" sort="true"/>
+        </test>
+        <!--
+            Defaults, only fasta output, reference from cache
+        -->
+        <test expect_num_outputs="1">
+            <conditional name="reference_source">
+                <param name="reference_source_selector" value="cached"/>
+                <param name="ref_file" value="reference_fasta"/>
+            </conditional>
+            <param name="output_insertions" value="false"/>
+            <param name="sequences" value="subsampled.fasta"/>
+            <conditional name="translation">
+                <param name="translation_select" value="no"/>
+            </conditional>
+            <output name="output_fasta" file="output.fasta" sort="true"/>
+        </test>
+    </tests>
+    <help><![CDATA[
+
+**What it does**
+
+Nextalign is a viral genome sequence alignment algorithm used in Nextclade.
+
+It will perform a pairwise alignment of provided sequences against a given reference sequence using banded local alignment algorithm with
+affine gap-cost. Band width and rough relative positions are determined through seed matching.
+
+Nextalign will strip insertions relative to the reference and output them in a separate CSV file.
+
+Optionally, when provided with a gene map and a list of genes, Nextalign can perform translation of these genes.
+
+Currently Nextalign primarily focuses on SARS-CoV-2 genome, but it can be used on any virus, given a sufficiently similar
+reference sequence (less than a 5% divergence).
+
+    ]]></help>
+    <expand macro="citations" />
+</tool>

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/test-data/all_fasta.loc	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,1 @@
+reference_fasta	reference_fasta	reference_fasta	${__HERE__}/reference.fasta
\ No newline at end of file

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/test-data/genemap.gtf	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,18 @@
+# Gene map (genome annotation) of SARS-CoV-2 in GTF format.
+# For gene map purpses we only need some of the columns. We substitute unused values with "." as per GTF spec.
+# See GTF format reference at https://www.ensembl.org/info/website/upload/gff.html
+# seqname	source	feature	start	end	score	strand	frame	attribute
+.	.	gene	26245	26472	.	+	.	 gene_name "E"
+.	.	gene	26523	27191	.	+	.	 gene_name "M"
+.	.	gene	28274	29533	.	+	.	 gene_name "N"
+.	.	gene	29558	29674	.	+	.	 gene_name "ORF10"
+.	.	gene	28734	28955	.	+	.	 gene_name "ORF14"
+.	.	gene	266	13468	.	+	.	 gene_name "ORF1a"
+.	.	gene	13468	21555	.	+	.	 gene_name "ORF1b"
+.	.	gene	25393	26220	.	+	.	 gene_name "ORF3a"
+.	.	gene	27202	27387	.	+	.	 gene_name "ORF6"
+.	.	gene	27394	27759	.	+	.	 gene_name "ORF7a"
+.	.	gene	27756	27887	.	+	.	 gene_name "ORF7b"
+.	.	gene	27894	28259	.	+	.	 gene_name "ORF8"
+.	.	gene	28284	28577	.	+	.	 gene_name "ORF9b"
+.	.	gene	21563	25384	.	+	.	 gene_name "S"

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/test-data/insertions.csv	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,11 @@
+seqName,insertions
+"Bangladesh/BCSIR-NILMRC-222/2020",""
+"Bangladesh/BCSIR-NILMRC-249/2020",""
+"USA/WI-UW-704/2020",""
+"Bangladesh/BCSIR-NILMRC-338/2020",""
+"Switzerland/ZH-ETHZ-190035/2020",""
+"Switzerland/AG-ETHZ-190082/2020",""
+"Brazil/RJ-DCV5/2020",""
+"Brazil/RJ-DCVTV507Q/2020",""
+"Switzerland/BE-ETHZ-210066/2020",""
+"Switzerland/SO-ETHZ-210070/2020",""

--- /dev/null	Thu Jan 01 00:00:00 1970 +0000
+++ b/test-data/output.fasta	Thu Apr 08 07:52:26 2021 +0000
@@ -0,0 +1,20 @@
+>Bangladesh/BCSIR-NILMRC-222/2020
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+>Bangladesh/BCSIR-NILMRC-249/2020
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+>USA/WI-UW-704/2020
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+>Bangladesh/BCSIR-NILMRC-338/2020
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+>Brazil/RJ-DCV5/2020
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+>Brazil/RJ-DCVTV507Q/2020
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